第一步：多肽合成儀操作前準備——奠定成功基礎
 

　　環境與設備檢查
 

　　選擇干燥、清潔、溫度穩定的場所(20℃±5℃)，避免潮濕、高溫或灰塵干擾。
 

　　確保儀器安裝平穩，電源電壓、頻率與設備要求匹配(如壓縮空氣壓力“AIR”表需60-100psi，“N?”表需5-10psi)。
 

　　檢查溶劑儲液瓶、氣體管道連接是否緊密，防止泄漏。
 

　　材料與試劑準備
 

　　準備高純度氨基酸、活化試劑(如HBTU)、溶劑(DMF、DCM)及樹脂，確保無雜質。
 

　　根據合成方案稱量試劑，嚴格按比例混合(如3倍過量氨基酸用于偶聯反應)。
 

　　將樹脂加入反應器，用DCM溶脹后抽干，再用DMF洗滌去除雜質。
 

　　參數設定與校準
 

　　輸入多肽序列，設定反應條件(溫度、時間、溶劑比例)。
 

　　示例：Fmoc脫保護(20%哌啶/DMF，5分鐘×2次)；偶聯反應(3倍過量氨基酸，1小時)。
 

　　運行設備自檢程序，校準溫度、壓力、取液針等參數，確保傳感器精度。
 

　　第二步：合成過程操作——核心步驟解析
 

　　啟動合成程序
 

　　打開合成儀電源及壓縮空氣開關，啟動預設程序。
 

　　儀器自動完成脫保護(如Fmoc基團去除)、偶聯(氨基酸交聯)、洗滌循環，全程監測反應溫度、壓力及pH值。
 

　　關鍵操作要點
 

　　脫保護：使用堿性溶劑(如20%哌啶/DMF)去除氨基保護基團，需重復2次以確保徹底。
 

　　偶聯反應：將活化后的氨基酸溶液注入反應室，補充DMF至適當濃度，攪拌1小時形成肽鍵。
 

　　洗滌：每步反應后用DMF清洗，清除未反應物質和副產物，減少雜質積累。
 

　　實時監控與調整
 

　　通過UV吸光度或質譜分析監測反應進程，確保每一步按預期進行。
 

　　若發現反應液不均勻，調整攪拌器轉速；若溫度異常，檢查加熱盤位置。
 

　　第三步：合成后處理與維護——保障長期穩定
 

　　產物收集與純化
 

　　加入裂解液(如TFA/水/三異丙基硅烷=95:2.5:2.5)，室溫攪拌2小時，將多肽從樹脂上裂解下來。
 

　　過濾除去樹脂，濃縮裂解液后用乙醚沉淀粗肽，通過離心、洗滌得到固體產物。
 

　　使用高效液相色譜(HPLC)純化，去除雜質，獲得高純度多肽(>95%)。
 

　　多肽合成儀設備清潔與保養

 

　　即時清潔：合成結束后，立即用乙醇或去離子水清洗反應容器、針頭、泵頭和管路，避免殘留試劑腐蝕設備。
 

　　定期維護：每月更換磨損部件(如密封圈、針頭)，校準傳感器精度；每季度潤滑機械部分，保持運行順暢。
 

　　長期存放：若設備閑置，清洗干凈后拆卸存放在干燥、通風處，防止生銹或受潮。
 

　　故障排查與記錄
 

　　常見問題：泵頭漏液(更換密封圈)、反應容器溫度過高(調整加熱盤位置)、設備無法開機(檢查電源及控制板)。
 

　　記錄與報告：詳細記錄每一步操作參數(試劑用量、反應時間、溫度)及產物純度，生成實驗報告，為后續優化提供依據。